Chlupové cibulky, nasální hlen, ušní štěp. To jsou tři hlavní možnosti odběru vzorků používané u skotu pro analýzu DNA. Nasální stěrovky se v praxi příliš neosvědčily, a tak chovatelé v drtivé většině případů posílají do laboratoře chlupy. Ne každý chovatel je však umí odebrat tak, aby byly pro analýzu použitelné. Proto ČMSCH přichází s novým způsobem, který je ve světě zcela běžný a mnohdy i rozšířenější – odběru ušního štěpu s pomocí speciální ušní známky se vzorkovnicí. Tato metoda zajistí nejlepší možnou kvalitu odebírané tkáně pro účely izolace DNA a současně umožňuje vzorky skladovat a opakovaně využít.

O systému systematického a dlouhodobého skladování vzorků pro případné budoucí použití jednáme s Českomoravskou společností chovatelů. Nabídku bychom měli být schopni představit v nejbližší době.

Hlavním praktickým problémem tohoto způsobu odběru vzorků je fakt, že dodavatelem setu je norská společnost OS ID a k odběru a aplikaci ušní známky je potřeba jiných kleští, než na známky Zee Tags. Ty dnes díky vysoké kvalitě patří suverénně k nejvyužívanějším (podíl na trhu přesahuje 70 %), avšak jejich výrobce zase nenabízí podobný set. Pokud je však chovatel ochoten nosit s sebou dvoje aplikační kleště, je ČMSCH připravena vydávat chovatelům jednu známku s odběrovkou a druhou od firmy Zee Tags. Alternativou je potom odběrový set od firmy Allflex, jejíž zastoupení na českém trhu zajišťuje společnost Hema Malšice.

Postup odběru ušní chrupavky pomocí setu
(detailní návod včetně doprovodných obrázků najdete ke stažení níže)

1. Vložení samce do kleští
Stiskněte pojistnou pružinu na straně kleští, tím umožníte zasunout známku do otvoru. Uvolněte pružinu čímž zafixujete samčí část odběrové sady v kleštích.

2. Vložení samice do kleští
Stiskněte pružinu na vnitřní straně kleští a vložte samici známky do kleští. Uvolněním pružiny známku v kleštích fixujete.

3. Aplikace známky do ucha
Při aplikaci ušních známek vždy umístěte samičí část dovnitř a samčí část na vnější stranu ucha. Ujistěte se, že se zvíře během aplikace nemůže pohybovat. Při uzavírání kleští použijte pevný a konstantní tlak. Uslyšíte dvoje „kliknutí“. Nechte kleště, aby se otevřely okamžitě poté, co uslyšíte druhé „kliknutí“.

4. Vizuální kontrola odběru
Známka zůstává v uchu a jehla se vzorkem tkáně je po dokončení aplikace fixována v čelisti kleští. Vzorek tkáně je jasně viditelný uvnitř jehly. Pokud je růžový křížový píst stále viditelný i po odběru vzorků, jehla je prázdná. Pokud růžový píst již není viditelný, byl úspěšně odebrán vzorek tkáně.

5. Vložení krycí tubičky na jehlu
Je dobrým zvykem držet aplikátor tak, aby jehla při nasazování zkumavky na vzorky směřovala dolů. Tím se zabrání ztrátě konzervační tekutiny uvnitř v místě narušení krycího těsnění. Tubičku nasuňte na nerezovou jehlu. Jehla je po celou dobu pevně fixována uvnitř kleští. Tubičku silným tlakem zatlačte na jehlu.
Připojte obě části k sobě dostatečným tlakem kleští, dokud plastová tubička „nezaklapne“ na místo na základně odběrové jehly. Ujistěte se, že oba kusy (jehla a tubička) jsou oddělitelně připevněny k sobě.

6. Vyjmutí odběrové sady z kleští
Zkontrolujte, zda je jehla ve zkumavce se vzorkem pevně utěsněna. Zatlačte na bezpečnostní pružinu na boku čelistí, vyjměte odběrovou sadu z kleští.

7. Odběr je ukončen
Tubička je čirá, a proto je možné vizuálně kontrolovat, že vzorek tkáně byl do zkumavky úspěšně odebrán (hrot odběrové jehly má konec buď zelený nebo bílý). Odběrový set je připraven k odeslání do laboratoře imunogenetiky.

Obecné informace

Uzavřené odběrové sety vkládejte jednotlivě do transportních sáčků, pevně uzavřete zip lock a čitelně vepište číslo zvířete. Transportní sáčky s popiskem jsou dodávány společně s odběrovými sety. V konzervační kapalině mohou být vzorky konzervovány jeden měsíc při pokojové teplotě, aniž by to mělo vliv na extrakci DNA pro genomickou analýzu. Vzorky mohou být také uloženy v lednici.
Vzorky nemusíte zasílat jednotlivě. Po nashromáždění dostatečného počtu vložte uzavřené sáčky například do bublinkové obálky nebo obálky z pevného kartónu.
Odběrové sety jsou šetrné ke zvířatům. S průměrem jehly pouhých 3 mm zůstává v uchu pouze malý otvor, skrz který je vizuální značka bezpečně připevněna.
Pro odběr kvalitního vzorku tkáně je nezbytné zvíře fixovat. Ujistěte se, že se zvíře během procesu odběru vzorků identifikace nemůže pohybovat. V kombinaci se značením vždy prvně použijte odběrovou sadu a teprve pak normální známku,
zvíře klade při prvním procvaknutí boltce menší odpor.
Udržujte aplikátor v čistotě a všechny pohyblivé části funkční. Doporučuje se lehké použití silikonového oleje ve spreji. Kleště ošetřete zvláště před delším skladováním. Dle potřeby kleště dezinfikujte.

Kontaktní informace

ČMSCH, a.s.
Laboratoř iGenetiky
Benešovská 123
252 09 Hradištko
Tel: 257 896 329
imunogenetika@cmsch.cz

Připojený soubor

Návod na práci s odběrovým setem.pdf, 1 MB Detailní návod, jak pracovat s odběrovým setem pro odběr ušního štěpu pro potřeby izolace DNA